Técnica de secuenciación en la enfermedad cerebrovascular hemorrágica

 Tema: Análisis sistemático de ARN pequeños derivados del ARNt revela nuevos objetivos terapéuticos potenciales de la medicina tradicional china sobre la hemorragia intracerebral.

Objetivo: explorar nuevos objetivos terapéuticos de BYHWD (famosa medicina tradicional china) mediante la secuenciación de ARN, para evaluar los niveles de expresión del ARNt.

Muestra: tejido cerebral de rata macho que rodean la región hemorrágica

Ácido nucleico: ARNt

Gen a secuenciar:  Foxo1, Mapk1, Sos1, Smad3

Método de extracción: utilización de kit NextSeq 500/550 V2

Técnica: secuenciación de taRNA

Conclusión: Los ARNt podrían ser nuevos objetivos terapéuticos potenciales para que BYHWD regule las vías biológicas inducidas por ICH

Fuente:  https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6429019/

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en la enfermedad cerebrovascular hemorrágica

 "La muerte neuronal después de un accidente cerebrovascular hemorrágico in vitro e in vivo comparte características de ferroptosis y nefroptosis"

El estudio tuvo como objetivo identificar los mecanismo subyacentes de muerte celular atribuibles a una lesión por hemoglobina y hemina para ampliar las opciones de tratamiento. Para ello se uso muestras de neuronas corticales primarias de ratones CD-1/ICR en el día 15 embrionario cultivadas a 37°C y expuestas a hemoglobina.

Estudios demuestran que el aumento en el mensaje de los genes RIP1 y RIP3 median la muerte celular necroptótica y que los niveles de ARNm de estos genes aumentan con hemina.

Para la extracción de ARN total se usó el kit de aislamiento ARN NucleoSpin, realizaron PCR en tiempo real usando Taqman RNA-to-CT 1-Step Kit para ratón RIP1 y RIP3. 

Llegando a la conclusión de que los mediadores tóxicos establecidos a partir de hemina y hemoglobina, indujeron la muerte de estas neuronas a través de características de muerte celular ferroptótica o necroptótica. 

Referencias:

1. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5613764/

Alteraciones de la Epigenómica de la Enfermedad cerebrovascular hemorrágica

 Los cambios en el epigenoma a lo largo de la vida son responsables no solo de controlar el desarrollo normal, homeostasis y envejecimiento, también media respuestas a las lesiones. 

La metilación del ADN regula la expresión génica global, específica y la promoción de procesos celulares importantes. Una metilación anormal relacionada con el ACV inhibe el proceso de transcripción y promueve la unión de las proteínas del dominio de unión metil-CpG, reclutan complejos reguladores que contienen factores epigenéticos en loci genómicos metilados para orquestar coordinadamente el silenciamiento genético reversible y a largo plazo, un factor importante para la metilación es la metilentetraidrofolato reductasa (MTHFR), un déficit en esta provoca hiperhomocisteinemia y aumenta el riesgo de sufrir un ACV.

El estilo de vida influye mucho ya que una mala alimentación, sedentarismo, fumar e ingerir alcohol aumentan el riego de sufrir una hemorragia cerebral.

Referencias:

1) https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3685873/

2) https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30714535/

3)https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0122726216000161

ALTERACIONES EN LA TRADUCCION DE LA ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR HEMORRÁGICA

Existen algunas proteínas y genes que al tener una mala formación va a desencadenar en un ACV hemorrágico, algunas de ellas pueden ser el Factor XIII en la terapia trombolítica en stroke, Factor XII  con el estudio del polimorfismo y el riesgo de trombosis venosa, genes como el Gen APOE-4 en el cual las personas que lo heredan tienen mayor tendencia a sufrir un ACV y las proteínas hnRNP que en el caso de haber una alteración en su función llegan a producir una respuesta inflamatoria en la que se engloba la producción de interleucinas, factor de necrosis tumoral e interferón gamma, generando citotoxicidad neuronal.

fig1. proceso de traducción 

Bibliografía:

1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27215579/
2. https://link.springer.com/article/10.1385/JMN:23:3:205
3. https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2020.00754/full
4. https://www.redalyc.org/pdf/3092/309245772025.pdf

Alteraciones de la Transcripción del ADN en el Ictus cerebrovascular hemorrágico

En el endotelio cerebral actúan diversos factores de transcripción intracelular, como por ejemplo el factor nuclear B (NFβ), el cual controla la transcripción de ADN. Los errores de este factor ocasiona alteraciones metabólicas que dañan la membrana celular, produciendo la excesiva entrada de Na+ al medio interno, la salida de K + hacia el medio externo y el ingreso de Ca++ a las células, activando fosfolipasas, calpaína y endonucleasa, enzimas que dañan estructuras celulares. Este factor también se ve relacionado con la respuesta celular frente al estrés, LDL oxidadas, citoquinas. El MEF2 media la respuesta al estrés en algunos tejidos, al disminuir en un ACV da entrada libre a la muerte neuronal.

fig1. transcripción de la información genética 

Obtenido de: 

1)https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30576920/

2)http://www.acnweb.org/guia/g8cap3.pdf

3)https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0092867412010604